α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)为(Wei)水(Shui)解(Jie)酶(Mei)的(De)一(Yi)种(Zhong)。(?)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)广(Guang)泛(Fan)存(Cun)在(Zai)于(Yu)动(Dong)物(Wu)、(?)植(Zhi)物(Wu)和(He)微(Wei)生(Sheng)物(Wu)体(Ti)内(Nei)，(?)它(Ta)可(Ke)从(Cong)非(Fei)还(Huan)原(Yuan)末(Mo)端(Duan)水(Shui)解(Jie)低(Di)聚(Ju)糖(Tang)和(He)多(Duo)聚(Ju)糖(Tang)的(De)α-1,4-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)键(Jian)，(?)也(Ye)能(Neng)作(Zuo)用(Yong)于(Yu)淀(Dian)粉(Fen)的(De)α-1,6-糖(Tang)苷(Gan)键(Jian)，(?)在(Zai)高(Gao)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)受(Shou)体(Ti)环(Huan)境(Jing)中(Zhong)还(Huan)可(Ke)催(Cui)化(Hua)转(Zhuan)糖(Tang)苷(Gan)反(Fan)应(Ying)。(?)研(Yan)究(Jiu)表(Biao)明(Ming)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)在(Zai)不(Bu)同(Tong)领(Ling)域(Yu)的(De)开(Kai)发(Fa)和(He)应(Ying)用(Yong)都(Du)具(Ju)有(You)很(Hen)好(Hao)的(De)经(Jing)济(Ji)和(He)社(She)会(Hui)效(Xiao)益(Yi)。(?)
1、(?)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)的(De)简(Jian)介(Jie)
α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)(EC.3.2.1.20，(?)α-Glucosidases) 为(Wei)淀(Dian)粉(Fen)水(Shui)解(Jie)酶(Mei)类(Lei)中(Zhong)的(De)一(Yi)种(Zhong)，(?)主(Zhu)要(Yao)在(Zai)细(Xi)胞(Bao)外(Wai)起(Qi)作(Zuo)用(Yong)。(?)它(Ta)从(Cong)多(Duo)糖(Tang)的(De)非(Fei)还(Huan)原(Yuan)末(Mo)端(Duan)水(Shui)解(Jie)底(Di)物(Wu)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)键(Jian)，(?)产(Chan)生(Sheng)α-D-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)，(?)通(Tong)常(Chang)把(Ba)它(Ta)们(Men)归(Gui)类(Lei)于(Yu)水(Shui)解(Jie)酶(Mei)第(Di)3类(Lei),主(Zhu)要(Yao)水(Shui)解(Jie)二(?)糖(Tang)、(?)低(Di)聚(Ju)糖(Tang)、(?)芳(Fang)香(Xiang)糖(Tang)苷(Gan)，(?)能(Neng)以(Yi)蔗(Zhe)糖(Tang)和(He)多(Duo)聚(Ju)糖(Tang)为(Wei)底(Di)物(Wu)。(?)同(Tong)时(Shi)，(?)
它(Ta)还(Huan)具(Ju)有(You)转(Zhuan)糖(Tang)苷(Gan)作(Zuo)用(Yong)，(?)可(Ke)将(Jiang)低(Di)聚(Ju)糖(Tang)中(Zhong)的(De)，(?)α-1，(?)4-糖(Tang)苷(Gan)键(Jian)转(Zhuan)化(Hua)成(Cheng)α-1，(?)6-糖(Tang)苷(Gan)键(Jian)或(Huo)其(Qi)他(Ta)形(Xing)式(Shi)的(De)链(Lian)接(Jie)，(?)从(Cong)而(?)得(De)到(Dao)非(Fei)发(Fa)酵(Jiao)性(Xing)的(De)低(Di)聚(Ju)异(Yi)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)或(Huo)糖(Tang)酯(Zhi)、(?)糖(Tang)肽(Tai)等(Deng)。(?)按(An)一(Yi)级(Ji)结(Jie)构(Gou)可(Ke)将(Jiang)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)归(Gui)为(Wei)水(Shui)解(Jie)酶(Mei)13类(Lei)的(De)31家(Jia)族(Zu)。(?)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)通(Tong)常(Chang)按(An)底(Di)物(Wu)专(Zhuan)一(Yi)性(Xing)分(Fen)为(Wei)3个(Ge)类(Lei)型(Xing)。(?)Ⅰ(?)型(Xing)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)水(Shui)解(Jie)芳(Fang)基(Ji)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)如(Ru)对(Dui)--硝(Xiao)基(Ji)苯(Ben)酚(Fen)α-D-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)吡(Bi)喃(Nan)苷(Gan)(pNPG ) ，(?)且(Qie)水(Shui)解(Jie)速(Su)率(Lu)比(Bi)低(Di)聚(Ju)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)快(Kuai)。(?)Ⅱ(?)型(Xing)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)对(Dui)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)具(Ju)有(You)高(Gao)活(Huo)性(Xing)，(?)而(?)对(Dui)芳(Fang)基(Ji)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)活(Huo)性(Xing)低(Di)。(?)Ⅲ(?)型(Xing)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)与(Yu)Ⅱ(?)型(Xing)类(Lei)似(Si)，(?)但(Dan)它(Ta)水(Shui)解(Jie)低(Di)聚(Ju)糖(Tang)和(He)淀(Dian)粉(Fen)的(De)速(Su)率(Lu)基(Ji)本(Ben)一(Yi)样(Yang)。(?)
2、(?)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)来(Lai)源(Yuan)及(Ji)分(Fen)布(Bu)
α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)在(Zai)自(Zi)然(Ran)界(Jie)分(Fen)布(Bu)广(Guang)泛(Fan)，(?)种(Zhong)类(Lei)繁(Fan)多(Duo)，(?)性(Xing)质(Zhi)各(Ge)异(Yi)，(?)几(Ji)乎(Hu)存(Cun)在(Zai)于(Yu)所(Suo)有(You)生(Sheng)物(Wu)体(Ti)内(Nei)。(?)目(Mu)前(Qian)已(Yi)经(Jing)进(Jin)行(Xing)研(Yan)究(Jiu)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)除(Chu)少(Shao)数(Shu)来(Lai)源(Yuan)于(Yu)植(Zhi)物(Wu)和(He)动(Dong)物(Wu)外(Wai)，(?)绝(Jue)大(Da)多(Duo)数(Shu)均(Jun)来(Lai)自(Zi)于(Yu)微(Wei)生(Sheng)物(Wu)中(Zhong)。(?)细(Xi)菌(Jun)、(?)霉(Mei)菌(Jun)及(Ji)酵(Jiao)母(Mu)菌(Jun)等(Deng)一(Yi)些(Xie)菌(Jun)株(Zhu)能(Neng)分(Fen)泌(Mi)此(Ci)酶(Mei)，(?)其(Qi)中(Zhong)产(Chan)酶(Mei)较(Jiao)多(Duo)的(De)是(Shi)黑(Hei)曲(Qu)霉(Mei)，(?)市(Shi)场(Chang)上(Shang)销(Xiao)售(Shou)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)产(Chan)品(Pin)大(Da)都(Du)为(Wei)黑(Hei)曲(Qu)霉(Mei)发(Fa)酵(Jiao)生(Sheng)产(Chan)所(Suo)
得(De)。(?)
3、(?)微(Wei)生(Sheng)物(Wu)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)研(Yan)究(Jiu)现(Xian)状(Zhuang)
微(Wei)生(Sheng)物(Wu)来(Lai)源(Yuan)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)相(Xiang)对(Dui)分(Fen)子(Zi)量(Liang)一(Yi)般(Ban)在(Zai)50~120kDa之(Zhi)间(Jian)。(?)不(Bu)同(Tong)来(Lai)
源(Yuan)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)的(De)相(Xiang)性(Xing)质(Zhi)则(Ze)差(Cha)异(Yi)很(Hen)大(Da)。(?)同(Tong)一(Yi)种(Zhong)属(Shu)的(De)微(Wei)生(Sheng)物(Wu)，(?)除(Chu)少(Shao)数(Shu)外(Wai)，(?)它(Ta)们(Men)所(Suo)产(Chan)生(Sheng)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)性(Xing)质(Zhi)差(Cha)异(Yi)也(Ye)较(Jiao)大(Da)。(?)例(Li)如(Ru)，(?)枯(Ku)草(Cao)杆(Gan)菌(Jun)属(Shu)的(De)不(Bu)同(Tong)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)分(Fen)子(Zi)量(Liang)一(Yi)般(Ban)在(Zai)65~120kDa，(?)有(You)些(Xie)属(Shu)酸(Suan)性(Xing)水(Shui)解(Jie)酶(Mei)，(?)有(You)些(Xie)属(Shu)中(Zhong)性(Xing)水(Shui)解(Jie)酶(Mei)，(?)最(Zui)适(Shi)温(Wen)度(Du)各(Ge)异(Yi)，(?)底(Di)物(Wu)专(Zhuan)一(Yi)性(Xing)也(Ye)不(Bu)尽(Jin)相(Xiang)同(Tong)，(?)有(You)的(De)主(Zhu)要(Yao)降(Jiang)解(Jie)直(Zhi)链(Lian)淀(Dian)粉(Fen)、(?)有(You)的(De)水(Shui)解(Jie)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)和(He)低(Di)聚(Ju)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)、(?)有(You)的(De)具(Ju)有(You)较(Jiao)宽(Kuan)的(De)底(Di)物(Wu)专(Zhuan)一(Yi)性(Xing)，(?)可(Ke)水(Shui)解(Jie)多(Duo)种(Zhong)底(Di)物(Wu)。(?) 不(Bu)同(Tong)的(De)嗜(Shi)热(Re)菌(Jun)产(Chan)生(Sheng)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)，(?)分(Fen)子(Zi)量(Liang)差(Cha)异(Yi)较(Jiao)大(Da)，(?)嗜(Shi)热(Re)温(Wen)度(Du)低(Di)的(De)为(Wei)65℃(?)，(?)最(Zui)高(Gao)可(Ke)达(Da)到(Dao) 100℃(?)。(?)
3.1枯(Ku)草(Cao)杆(Gan)菌(Jun)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)
1991年(Nian)Bradley等(Deng)研(Yan)究(Jiu)了(Liao)嗜(Shi)热(Re)枯(Ku)草(Cao)芽(Ya)孢(Bao)杆(Gan)菌(Jun)(Bacillus subtilis) 和(He)热(Re)溶(Rong)芽(Ya)孢(Bao)杆(Gan)菌(Jun)(Bacillus caldolyticus) α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)。(?)2种(Zhong)酶(Mei)均(Jun)具(Ju)有(You)胞(Bao)内(Nei)低(Di)聚(Ju)-1,4-α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)活(Huo)性(Xing)，(?)经(Jing)薄(Bao)层(Ceng)分(Fen)析(Xi)，(?)它(Ta)们(Men)水(Shui)解(Jie)直(Zhi)链(Lian)低(Di)聚(Ju)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)产(Chan)生(Sheng)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)和(He)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)，(?)并(Bing)水(Shui)解(Jie)普(Pu)鲁(Lu)兰(Lan)。(?)二(?)者(Zhe)均(Jun)不(Bu)水(Shui)解(Jie)Pnpg、(?)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)、(?)异(Yi)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)、(?)异(Yi)麦(Mai)芽(Ya)三(San)糖(Tang)或(Huo)潘(Pan)糖(Tang)。(?)2种(Zhong)酶(Mei)均(Jun)由(You)二(?)亚(Ya)基(Ji)组(Zu)成(Cheng)，(?)分(Fen)子(Zi)量(Liang)分(Fen)别(Bie)为(Wei)55kDa和(He)60kDa，(?)最(Zui)适(Shi)pH分(Fen)别(Bie)为(Wei)7.5和(He)7.0，(?)对(Dui)底(Di)物(Wu)p-硝(Xiao)基(Ji)-α-D-麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)苷(Gan)的(De)K m分(Fen)别(Bie)为(Wei)2.96mM和(He)1.31mM。(?)他(Ta)们(Men)在(Zai)1993年(Nian)进(Jin)一(Yi)步(Bu)研(Yan)究(Jiu)了(Liao)嗜(Shi)热(Re)芽(Ya)孢(Bao)枯(Ku)草(Cao)杆(Gan)菌(Jun)转(Zhuan)化(Hua)株(Zhu)(H-17) α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)。(?)此(Ci)酶(Mei)为(Wei)胞(Bao)内(Nei)酶(Mei)，(?)具(Ju)有(You)水(Shui)解(Jie)低(Di)聚(Ju)-1,4-糖(Tang)苷(Gan)键(Jian)活(Huo)性(Xing)，(?)也(Ye)可(Ke)水(Shui)解(Jie)直(Zhi)链(Lian)麦(Mai)芽(Ya)低(Di)聚(Ju)糖(Tang)产(Chan)生(Sheng)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)和(He)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)，(?)同(Tong)时(Shi)还(Huan)具(Ju)有(You)普(Pu)鲁(Lu)兰(Lan)酶(Mei)活(Huo)性(Xing)，(?)水(Shui)解(Jie)普(Pu)鲁(Lu)兰(Lan)产(Chan)生(Sheng)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)、(?)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)及(Ji)( 异(Yi)构(Gou)) 潘(Pan)糖(Tang)。(?)此(Ci)酶(Mei)对(Dui)pNPG、(?)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)、(?)异(Yi)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)、(?)异(Yi)麦(Mai)芽(Ya)三(San)糖(Tang)、(?)( 异(Yi)构(Gou))潘(Pan)糖(Tang)无(Wu)活(Huo)性(Xing)，(?)但(Dan)对(Dui)淀(Dian)粉(Fen)有(You)轻(Qing)微(Wei)的(De)水(Shui)解(Jie)作(Zuo)用(Yong)。(?)原(Yuan)酶(Mei)为(Wei)二(?)亚(Ya)基(Ji)，(?)亚(Ya)基(Ji)分(Fen)子(Zi)量(Liang)为(Wei)5.5kDa，(?)等(Deng)电(Dian)点(Dian)pI4.8，(?)最(Zui)适(Shi)pH7.5,5Mm Tris溶(Rong)液(Ye)可(Ke)80％(?)抑(Yi)制(Zhi)其(Qi)活(Huo)性(Xing)，(?)对(Dui)p-硝(Xiao)基(Ji)苯(Ben)酚(Fen)-α-D麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)苷(Gan)K m值(Zhi)为(Wei)1.46Mm，(?)最(Zui)适(Shi)酶(Mei)活(Huo)力(Li)温(Wen)度(Du)65℃(?)，(?)其(Qi)嗜(Shi)热(Re)活(Huo)性(Xing)需(Xu)要(Yao)最(Zui)低(Di)浓(Nong)度(Du)0.02%的(De)巯(Qiu)基(Ji)乙(Yi)醇(Chun)或(Huo) 0.005Mm的(De)EDTA。(?)氨(An)基(Ji)酸(Suan)分(Fen)析(Xi)发(Fa)现(Xian)H-17株(Zhu)产(Chan)生(Sheng)的(De)酶(Mei)与(Yu)枯(Ku)草(Cao)杆(Gan)菌(Jun)2S产(Chan)生(Sheng)的(De)酶(Mei)相(Xiang)比(Bi)，(?)前(Qian)者(Zhe)具(Ju)有(You)较(Jiao)多(Duo)数(Shu)量(Liang)的(De)疏(Shu)水(Shui)氨(An)基(Ji)酸(Suan)残(Can)基(Ji)，(?)是(Shi)酶(Mei)热(Re)稳(Wen)定(Ding)性(Xing)和(He)水(Shui)解(Jie)活(Huo)性(Xing)增(Zeng)加(Jia)的(De)原(Yuan)因(Yin)。(?)
3.2 出(Chu)芽(Ya)短(Duan)梗(Geng)霉(Mei)菌(Jun)胞(Bao)内(Nei)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)
出(Chu)芽(Ya)短(Duan)梗(Geng)霉(Mei)菌(Jun)(Aureobasidium pullulasns)可(Ke)产(Chan)胞(Bao)内(Nei)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)，(?)1993年(Nian)Badal等(Deng)将(Jiang)此(Ci)酶(Mei)经(Jing)Trition X-100溶(Rong)解(Jie)、(?)Q-Sephacry处(Chu)理(Li)，(?)羟(Qiang)磷(Lin)灰(Hui)石(Shi)、(?)辛(Xin)基(Ji)---琼(Qiong)脂(Zhi)糖(Tang)柱(Zhu)层(Ceng)析(Xi)、(?)Sephacryl S -200 (丙(Bing)烯(Xi)葡(Pu)聚(Ju)糖(Tang)凝(Ning)胶(Jiao)) 过(Guo)滤(Lu)可(Ke)纯(Chun)化(Hua)124倍(Bei)，(?)酶(Mei)活(Huo)达(Da)到(Dao)316.82 U蛋(Dan)白(Bai)。(?)在(Zai)50℃(?)时(Shi)最(Zui)适(Shi)Ph4.0，(?)稳(Wen)定(Ding)pH范(Fan)围(Wei)3.0~6.0，(?)在(Zai)60℃(?)时(Shi)稳(Wen)定(Ding)，(?)最(Zui)适(Shi)活(Huo)力(Li)温(Wen)度(Du)为(Wei)60℃(?)。(?)部(Bu)分(Fen)纯(Chun)化(Hua)的(De)酶(Mei)分(Fen)解(Jie)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)、(?)异(Yi)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)、(?)蔗(Zhe)糖(Tang)和(He)海(Hai)藻(Zao)糖(Tang)，(?)水(Shui)解(Jie)相(Xiang)对(Dui)速(Su)率(Lu)分(Fen)别(Bie)为(Wei)100，(?)60，(?)47，(?)和(He)50，(?)对(Dui)多(Duo)聚(Ju)糖(Tang)无(Wu)活(Huo)性(Xing)或(Huo)活(Huo)性(Xing)很(Hen)低(Di)，(?)酶(Mei)活(Huo)性(Xing)不(Bu)需(Xu)要(Yao)金(Jin)属(Shu)离(Li)子(Zi)参(Can)与(Yu)。(?)
3.3芽(Ya)孢(Bao)杆(Gan)菌(Jun)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)
Takii等(Deng)研(Yan)究(Jiu)的(De)嗜(Shi)热(Re)脂(Zhi)肪(Fang)芽(Ya)孢(Bao)杆(Gan)菌(Jun)( Bacillus stearothmophilus)ATCC12016α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)可(Ke)从(Cong)非(Fei)还(Huan)原(Yuan)末(Mo)端(Duan)专(Zhuan)一(Yi)性(Xing)水(Shui)解(Jie)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)和(He)α-葡(Pu)聚(Ju)糖(Tang)的(De)α-1,4-糖(Tang)苷(Gan)键(Jian)。(?)它(Ta)的(De)核(He)苷(Gan)酸(Suan)序(Xu)列(Lie)推(Tui)断(Duan)为(Wei)1665个(Ge)碱(Jian)基(Ji)对(Dui)，(?)由(You)555个(Ge)残(Can)基(Ji)组(Zu)成(Cheng)，(?)分(Fen)子(Zi)量(Liang)为(Wei)6.52kDa。(?)此(Ci)酶(Mei)与(Yu)蜡(La)状(Zhuang)芽(Ya)孢(Bao)杆(Gan)菌(Jun)(Bacillus cereus)ATCC7064、(?)嗜(Shi)热(Re)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)地(Di)衣(Yi)芽(Ya)孢(Bao)杆(Gan)菌(Jun)( Bacillus thermoglucosidasius)KPI006、(?)卡(Ka)尔(?)斯(Si)伯(Bo)酵(Jiao)母(Mu)(Saccharomyes carlsbergensis)CBII、(?)枯(Ku)草(Cao)杆(Gan)菌(Jun)(Bacillus sp.)SAM1606枯(Ku)草(Cao)杆(Gan)菌(Jun)等(Deng)的(De)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)和(He)变(Bian)性(Xing)链(Lian)球(Qiu)菌(Jun)(Streptococcus mutans) 的(De)右(You)旋(Xuan)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)及(Ji)大(Da)肠(Chang)杆(Gan)菌(Jun) ( Escherichia coli)ECLII6 的(De)海(Hai)藻(Zao)糖(Tang)6-磷(Lin)酸(Suan)水(Shui)解(Jie)酶(Mei)具(Ju)有(You)40%~57% 的(De)序(Xu)列(Lie)相(Xiang)似(Si)性(Xing)( 所(Suo)有(You)这(Zhe)些(Xie)酶(Mei)均(Jun)显(Xian)示(Shi)出(Chu)于(Yu)蜡(La)状(Zhuang)芽(Ya)孢(Bao)杆(Gan)菌(Jun)( B.cereus) 葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)相(Xiang)似(Si)的(De)X衍(Yan)射(She)二(?)级(Ji)结(Jie)构(Gou)。(?)他(Ta)们(Men)认(Ren)为(Wei)此(Ci)酶(Mei)位(Wei)于(Yu)N-端(Duan)的(De)一(Yi)个(Ge)活(Huo)性(Xing)中(Zhong)心(Xin)，(?)为(Wei)(α/B)桶(Tong)状(Zhuang)折(Zhe)叠(Die)结(Jie)构(Gou)。(?)
2009 年(Nian)Arzu 等(Deng)对(Dui)地(Di)衣(Yi)芽(Ya)孢(Bao)杆(Gan)菌(Jun)(Geobacillus sp. )A343和(He)嗜(Shi)热(Re)菌(Jun)A343的(De)嗜(Shi)热(Re)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)性(Xing)质(Zhi)进(Jin)行(Xing)了(Liao)研(Yan)究(Jiu)。(?)他(Ta)们(Men)从(Cong)地(Di)衣(Yi)芽(Ya)孢(Bao)杆(Gan)菌(Jun)A343和(He)嗜(Shi)热(Re)菌(Jun)A343中(Zhong)部(Bu)分(Fen)纯(Chun)化(Hua)分(Fen)离(Li)出(Chu)2种(Zhong)嗜(Shi)热(Re)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)。(?)A343的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)最(Zui)适(Shi)温(Wen)度(Du)60℃(?)、(?)Ph6.8、(?)对(Dui)pNPG底(Di)物(Wu)的(De)Km值(Zhi)为(Wei)1.38Mm.A343α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)最(Zui)适(Shi)温(Wen)度(Du)65℃(?)、(?)Ph8.5。(?) 通(Tong)过(Guo)20种(Zhong)底(Di)物(Wu)专(Zhuan)一(Yi)性(Xing)和(He)薄(Bao)层(Ceng)层(Ceng)析(Xi)分(Fen)析(Xi)证(Zheng)明(Ming)A343α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)具(Ju)有(You)较(Jiao)高(Gao)的(De)转(Zhuan)糖(Tang)苷(Gan)活(Huo)性(Xing)，(?)而(?)A343α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)有(You)较(Jiao)宽(Kuan)的(De)底(Di)物(Wu)专(Zhuan)一(Yi)性(Xing)。(?)A343α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)底(Di)物(Wu)为(Wei)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)、(?)糊(Hu)精(Jing)、(?)松(Song)二(?)糖(Tang)、(?)麦(Mai)芽(Ya)三(San)糖(Tang)、(?)麦(Mai)芽(Ya)戊(Wu)糖(Tang)、(?)麦(Mai)芽(Ya)四(Si)糖(Tang)、(?)麦(Mai)芽(Ya)六(Liu)糖(Tang)、(?)苯(Ben)基(Ji)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)吡(Bi)喃(Nan)。(?)A343α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)更(Geng)多(Duo)的(De)水(Shui)解(Jie)糊(Hu)精(Jing)、(?)松(Song)二(?)糖(Tang)、(?)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)、(?)苯(Ben)基(Ji)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)吡(Bi)喃(Nan)苷(Gan)、(?)麦(Mai)芽(Ya)三(San)糖(Tang)、(?)麦(Mai)芽(Ya)四(Si)糖(Tang)、(?)麦(Mai)芽(Ya)戊(Wu)糖(Tang)、(?)麦(Mai)芽(Ya)六(Liu)糖(Tang)、(?)异(Yi)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)、(?)蔗(Zhe)糖(Tang)和(He)曲(Qu)二(?)糖(Tang)等(Deng)的(De)α-1,2、(?)α-1，(?)3、(?)α-1,4、(?)α-1,6键(Jian)。(?)60℃(?)保(Bao)温(Wen)5h，(?)A343 和(He)A333 的(De)活(Huo)性(Xing)保(Bao)留(Liu)分(Fen)别(Bie)为(Wei) 92 %和(He)83% 。(?)经(Jing)试(Shi)验(Yan)测(Ce)试(Shi)它(Ta)们(Men)能(Neng)抵(Di)抗(Kang)许(Xu)多(Duo)变(Bian)性(Xing)剂(Ji)#抑(Yi)制(Zhi)剂(Ji)和(He)金(Jin)属(Shu)离(Li)子(Zi)2种(Zhong)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)的(De)转(Zhuan)糖(Tang)苷(Gan)活(Huo)性(Xing)和(He)淀(Dian)粉(Fen)水(Shui)解(Jie)能(Neng)力(Li)均(Jun)具(Ju)有(You)潜(Qian)在(Zai)的(De)开(Kai)发(Fa)价(Jia)值(Zhi)。(?)
3.4 曲(Qu)霉(Mei)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)
黑(Hei)曲(Qu)霉(Mei)(Aspergillus niger)在(Zai)以(Yi)木(Mu)薯(Shu)淀(Dian)粉(Fen)为(Wei)碳(Tan)源(Yuan)的(De)培(Pei)养(Yang)基(Ji)中(Zhong)可(Ke)产(Chan)生(Sheng)2种(Zhong)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)淀(Dian)粉(Fen)水(Shui)解(Jie)酶(Mei): α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)酶(Mei)和(He)α-淀(Dian)粉(Fen)酶(Mei)。(?)2种(Zhong)酶(Mei)经(Jing)硫(Liu)酸(Suan)铵(An)沉(Chen)淀(Dian)、(?)离(Li)子(Zi)交(Jiao)换(Huan)层(Ceng)析(Xi)和(He)2次(Ci)凝(Ning)胶(Jiao)过(Guo)滤(Lu)层(Ceng)析(Xi)可(Ke)纯(Chun)化(Hua)为(Wei)2种(Zhong)纯(Chun)酶(Mei)，(?)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)淀(Dian)粉(Fen)酶(Mei) 1和(He)葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)淀(Dian)粉(Fen)酶(Mei)2，(?)分(Fen)子(Zi)量(Liang)分(Fen)别(Bie)为(Wei)74kDa和(He)96kDa，(?)等(Deng)电(Dian)点(Dian) pI分(Fen)别(Bie)为(Wei)3.8和(He)3.95，(?)最(Zui)适(Shi) pH则(Ze)分(Fen)别(Bie)为(Wei)4.2和(He)4.5，(?)稳(Wen)定(Ding)pH范(Fan)围(Wei) 3.5~9.0。(?)这(Zhe)2种(Zhong)酶(Mei)均(Jun)有(You)嗜(Shi)热(Re)性(Xing)，(?)最(Zui)适(Shi)温(Wen)度(Du)分(Fen)别(Bie)为(Wei)60℃(?)和(He)65℃(?)，(?)在(Zai)60℃(?)时(Shi)酶(Mei)活(Huo)性(Xing)可(Ke)稳(Wen)定(Ding)1h。(?)酶(Mei)动(Dong)力(Li)学(Xue)分(Fen)析(Xi)表(Biao)明(Ming)2种(Zhong)酶(Mei)水(Shui)解(Jie)支(Zhi)链(Lian)淀(Dian)粉(Fen)均(Jun)比(Bi)直(Zhi)链(Lian)淀(Dian)粉(Fen)更(Geng)有(You)效(Xiao)，(?)说(Shuo)明(Ming)2种(Zhong)酶(Mei)均(Jun)具(Ju)有(You)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)的(De)水(Shui)解(Jie)活(Huo)性(Xing)。(?)
3.5 其(Qi)他(Ta)微(Wei)生(Sheng)物(Wu)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)
疏(Shu)棉(Mian)状(Zhuang)嗜(Shi)热(Re)丝(Si)孢(Bao)菌(Jun)(Thermomyces lanuginosus)在(Zai)生(Sheng)长(Chang)过(Guo)程(Cheng)中(Zhong)可(Ke)用(Yong)右(You)旋(Xuan)糖(Tang)作(Zuo)为(Wei)碳(Tan)源(Yuan)，(?)它(Ta)们(Men)在(Zai)早(Zao)期(Qi)的(De)发(Fa)育(Yu)过(Guo)程(Cheng)中(Zhong)能(Neng)产(Chan)生(Sheng)一(Yi)种(Zhong)具(Ju)有(You)降(Jiang)解(Jie)右(You)旋(Xuan)糖(Tang)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)。(?)酶(Mei)活(Huo)高(Gao)峰(Feng)期(Qi)在(Zai)培(Pei)养(Yang)22 h后(Hou)出(Chu)现(Xian)，(?)在(Zai)菌(Jun)种(Zhong)培(Pei)养(Yang)的(De)稳(Wen)定(Ding)期(Qi)，(?)由(You)于(Yu)其(Qi)他(Ta)蛋(Dan)白(Bai)酶(Mei)的(De)影(Ying)响(Xiang)，(?)酶(Mei)的(De)活(Huo)力(Li)极(Ji)快(Kuai)地(Di)降(Jiang)低(Di)。(?)此(Ci)酶(Mei)是(Shi)一(Yi)种(Zhong)高(Gao)活(Huo)性(Xing)的(De)水(Shui)解(Jie)葡(Pu)聚(Ju)糖(Tang)苷(Gan)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)。(?)
4 α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)研(Yan)究(Jiu)发(Fa)展(Zhan)趋(Qu)势(Shi)
1982年(Nian)日(Ri)本(Ben)林(Lin)原(Yuan)生(Sheng)化(Hua)研(Yan)究(Jiu)所(Suo)成(Cheng)功(Gong)筛(Shai)选(Xuan)出(Chu)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)生(Sheng)产(Chan)菌(Jun)种(Zhong)，(?)使(Shi)该(Gai)酶(Mei)得(De)以(Yi)实(Shi)现(Xian)工(Gong)业(Ye)化(Hua)规(Gui)模(Mo)发(Fa)酵(Jiao)生(Sheng)产(Chan)，(?)产(Chan)品(Pin)大(Da)量(Liang)应(Ying)用(Yong)于(Yu)淀(Dian)粉(Fen)加(Jia)工(Gong)业(Ye)和(He)食(Shi)品(Pin)工(Gong)业(Ye)。(?)此(Ci)后(Hou)，(?)各(Ge)种(Zhong)新(Xin)型(Xing)的(De)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)及(Ji)其(Qi)新(Xin)的(De)应(Ying)用(Yong)受(Shou)到(Dao)空(Kong)前(Qian)的(De)重(Zhong)视(Shi)。(?)
从(Cong)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)研(Yan)究(Jiu)的(De)历(Li)史(Shi)进(Jin)程(Cheng)分(Fen)析(Xi)，(?)对(Dui)它(Ta)的(De)研(Yan)究(Jiu)可(Ke)分(Fen)为(Wei)3个(Ge)方(Fang)面(Mian): ①(?) 主(Zhu)要(Yao)集(Ji)中(Zhong)在(Zai)生(Sheng)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)的(De)微(Wei)生(Sheng)物(Wu)菌(Jun)种(Zhong)的(De)筛(Shai)选(Xuan)方(Fang)面(Mian)，(?)涉(She)及(Ji)菌(Jun)种(Zhong)培(Pei)养(Yang)、(?)酶(Mei)活(Huo)力(Li)提(Ti)高(Gao)、(?)酶(Mei)分(Fen)离(Li)纯(Chun)化(Hua)和(He)酶(Mei)的(De)基(Ji)本(Ben)理(Li)化(Hua)性(Xing)质(Zhi)研(Yan)究(Jiu)；(?)②(?)集(Ji)中(Zhong)在(Zai)酶(Mei)的(De)氨(An)基(Ji)酸(Suan)序(Xu)列(Lie)分(Fen)析(Xi)、(?)酶(Mei)的(De)结(Jie)构(Gou)分(Fen)析(Xi)、(?)酶(Mei)的(De)催(Cui)化(Hua)机(Ji)理(Li)研(Yan)究(Jiu)等(Deng); ③(?)集(Ji)中(Zhong)在(Zai)酶(Mei)的(De)应(Ying)用(Yong)开(Kai)发(Fa)，(?)包(Bao)括(Kuo)酶(Mei)的(De)水(Shui)解(Jie)底(Di)物(Wu)专(Zhuan)一(Yi)性(Xing)、(?)酶(Mei)水(Shui)解(Jie)底(Di)物(Wu)的(De)条(Tiao)件(Jian)和(He)速(Su)度(Du)、(?)酶(Mei)催(Cui)化(Hua)反(Fan)应(Ying)产(Chan)物(Wu)及(Ji)应(Ying)用(Yong)开(Kai)发(Fa)、(?)新(Xin)型(Xing)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)开(Kai)发(Fa)及(Ji)应(Ying)用(Yong)等(Deng)。(?)
目(Mu)前(Qian)，(?)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)已(Yi)广(Guang)泛(Fan)应(Ying)用(Yong)于(Yu)淀(Dian)粉(Fen)水(Shui)解(Jie)、(?)酒(Jiu)精(Jing)发(Fa)酵(Jiao)、(?)低(Di)聚(Ju)异(Yi)麦(Mai)芽(Ya)糖(Tang)生(Sheng)产(Chan)、(?)化(Hua)学(Xue)合(He)成(Cheng)、(?)代(Dai)谢(Xie)机(Ji)理(Li)研(Yan)究(Jiu)、(?)临(Lin)床(Chuang)检(Jian)测(Ce)和(He)疾(Ji)病(Bing)治(Zhi)疗(Liao)等(Deng)领(Ling)域(Yu)。(?)国(Guo)外(Wai)对(Dui)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)的(De)研(Yan)究(Jiu)较(Jiao)深(Shen)入(Ru)，(?)经(Jing)文(Wen)献(Xian)检(Jian)索(Suo)已(Yi)报(Bao)道(Dao)的(De)各(Ge)类(Lei)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)研(Yan)究(Jiu)达(Da)几(Ji)十(Shi)种(Zhong)，(?)日(Ri)本(Ben)、(?)美(Mei)国(Guo)、(?)丹(Dan)麦(Mai)等(Deng)国(Guo)家(Jia)已(Yi)实(Shi)现(Xian)微(Wei)生(Sheng)物(Wu)发(Fa)酵(Jiao)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)的(De)工(Gong)业(Ye)化(Hua)生(Sheng)产(Chan)。(?)我(Wo)国(Guo)对(Dui)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)研(Yan)究(Jiu)还(Huan)处(Chu)于(Yu)起(Qi)步(Bu)阶(Jie)段(Duan)，(?)主(Zhu)要(Yao)集(Ji)中(Zhong)在(Zai)第(Di)一(Yi)方(Fang)面(Mian)的(De)研(Yan)究(Jiu)，(?)对(Dui)酶(Mei)的(De)结(Jie)构(Gou)、(?)催(Cui)化(Hua)机(Ji)制(Zhi)、(?)酶(Mei)应(Ying)用(Yong)和(He)酶(Mei)产(Chan)品(Pin)开(Kai)发(Fa)等(Deng)方(Fang)面(Mian)的(De)报(Bao)道(Dao)很(Hen)少(Shao)，(?)更(Geng)没(Mei)有(You)工(Gong)业(Ye)化(Hua)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)的(De)产(Chan)品(Pin)，(?)研(Yan)究(Jiu)和(He)生(Sheng)产(Chan)用(Yong)酶(Mei)基(Ji)本(Ben)上(Shang)全(Quan)部(Bu)依(Yi)赖(Lai)进(Jin)口(Kou)。(?)今(Jin)后(Hou)我(Wo)国(Guo)α-葡(Pu)萄(Tao)糖(Tang)苷(Gan)酶(Mei)的(De)研(Yan)究(Jiu)和(He)产(Chan)品(Pin)开(Kai)发(Fa)任(Ren)重(Zhong)而(?)道(Dao)远(Yuan)。(?)
